Cần phải xác định và định lượng tế bào mô đệm trung mô (MSC) trong các mô nguồn của dịch hút cô đặc từ tủy xương người (BMAC), nhưng các phương pháp hiện tại để làm như vậy đã được thiết lập trong các quần thể tế bào nuôi cấy. Do dấu hiệu bề mặt và sự thay đổi biểu hiện gen trong các tế bào được nuôi cấy, người ta nghi ngờ rằng các chiến lược này có hiệu lực để định lượng MSC trong BMAC mới.
Mục đích:
Để thiết lập sự hiện diện, số lượng và tính không đồng nhất của các MSC có nguồn gốc từ BMAC trong BMAC được thao tác tối thiểu bằng cách sử dụng các chiến lược hiện có.
Phương pháp:
Năm chiến lược đã công bố để xác định MSC đã được so sánh về tính phù hợp và hiệu quả để định lượng BMAC-MSC ở cấp lâm sàng và MSC được nuôi cấy ở cấp phiên mã tế bào đơn trên các mẫu BMAC đang được sử dụng lâm sàng từ 15 bệnh nhân chỉnh hình và trên 1 mẫu MSC được nuôi cấy. Các chiến lược bao gồm (1) hướng dẫn của Hiệp hội Trị liệu Tế bào Quốc tế (ISCT), (2) Biểu hiện CD271, (3) hồ sơ phiên mã Ghazanfari và cộng sự, (4) hồ sơ phiên mã Jia và cộng sự, và (5) Silva et al hồ sơ phiên mã.
Các kết quả:
Các hướng dẫn của ISCT không xác định được bất kỳ MSC nào trong BMAC ở cấp độ phiên mã và chỉ có 1 trong 9 triệu tế bào ở cấp độ protein. Trong số 12.850 tế bào BMAC, 9 tế bào biểu hiện gen CD271. Chỉ có 116 trong số 396 gen Ghazanfari được phát hiện trong BMAC, trong khi không có tế bào nào biểu hiện tất cả chúng. Không có tế bào nào biểu hiện tất cả các gen Jia, nhưng 25 tế bào biểu hiện ít nhất 13 trong số 22. Không tế bào nào biểu hiện tất cả các gen Silva, nhưng 19 tế bào biểu hiện ít nhất 8 trong số 23. Quan trọng nhất, các chiến lược tự do hóa có xu hướng xác định các tế bào khác nhau và hầu hết chúng tập hợp lại với các tế bào miễn dịch.
Phần kết luận:
Các phương pháp hiện có sẵn cần được tự do hóa để xác định bất kỳ MSC nào trong BMAC của người tươi và thiếu sự đồng thuận ở mức độ biểu hiện protein và gen phiên mã đơn bào. Các tế bào khác nhau này nên được phân lập và thử thách để thiết lập sự khác biệt về kiểu hình.
Liên quan lâm sàng:
Nghiên cứu này đã chứng minh rằng các chiến lược cải tiến để định lượng nồng độ MSC trong BMAC cho các ứng dụng lâm sàng là cần thiết. Cho đến lúc đó, các liều MSC được điều khiển tối thiểu được tiêm nên được báo cáo là ước tính sơ bộ hoặc chưa biết.
(st) Thu Hiền